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蛋白純化填料解析——葡聚糖與瓊脂糖基質

更新時間:2021-11-11 點擊次數:5583

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今天要給大家介紹一下月旭科技蛋白純化填料中使用的兩種基質,分別為葡聚糖基質與瓊脂糖基質。


葡聚糖凝膠

交聯葡聚糖凝膠是由葡聚糖(dextran,又稱右旋糖酐)通過環氧氯丙烷交聯形成的球形凝膠。交聯劑環氧氯丙烷的兩個基團分別與兩個葡聚糖殘基中的游離羥基發生反應,使葡聚糖分子內或分子之間發生交聯,形成網狀結構的微球。葡聚糖是水溶性的,交聯后才得到非水溶性和具有一定耐壓強度的交聯葡聚糖凝膠,可直接用于凝膠色譜。合成交聯葡聚糖時糖濃度和交聯劑用量和反應條件決定了凝膠的交聯度和網孔大小,也決定了該填料的耐壓強度和排阻極限。

孔徑小的葡聚糖凝膠(G-10、G-15、G-25、G-50)主要用于脫鹽、肽與其他小分子的分離,通常分子量在100萬以上的生物大分子無法使用葡聚糖凝膠,要用瓊脂糖凝膠,凝膠型號G后面得數字粗略表示了10g該類型凝膠得吸水值(ml)。


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月旭Tandex G系列

葡聚糖凝膠產品性能

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瓊脂糖凝膠


瓊脂糖是從海洋紅藻中提取的天然高分子化合物,它是由β-D-半乳糖和3,6-脫水-L-半乳糖兩種單糖交替連接而成。其中β-D-半乳糖和3,6-脫水-L-半乳糖之間通過β(1→4)糖苷鍵連接,而3,6-脫水-L-半乳糖和β-D-半乳糖之間通過α(1→3)糖苷鍵連接。瓊脂糖在常溫下是固體,在水中加熱到45℃以上時溶解,在無交聯劑存在時冷卻能形成凝膠。當熱的瓊脂糖溶液(糖濃度2%~16%)進行冷卻時,鏈狀分子之間會先形成雙螺旋,并進一步自發聚集形成束狀結構,再進一步形成多孔的三維網狀結構的瓊脂糖凝膠。

糖溶液的濃度不同,凝膠的平均孔徑也不同,糖濃度大,凝膠的平均孔徑小,從而用于色譜時排阻極限也小。高流速的瓊脂糖凝膠耐壓可達0.3~0.4MPa,基本滿足蛋白質大規模分離的需要。


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