月旭層析填料選擇指南

凝膠過濾介質(zhì)Tanrose 4FF或Tanrose 6FF是經(jīng)典的病毒類疫苗純化方法，可以去除培養(yǎng)基中的雜蛋白、處理量大、快速的特點(diǎn)。柱高一般40-70cm，上樣量一般為10-15%。目前使用此方法生產(chǎn)的疫苗品種有：乙肝、狂犬、出血熱、流感等。

His標(biāo)簽重組蛋白可以很方便用鎳 IDA瓊脂糖凝膠FF（Ni Tanrose 6FF IDA）或鎳NTA瓊脂糖凝膠FF（Ni Tanrose 6FF NTA）分離，填料已經(jīng)螯合好了鎳離子，使用非常方便，有更高的吸附載量，特異性更強(qiáng)，可以選擇多種洗脫方式，是純化這類融合蛋白的最佳工具。

GST融合蛋白可以用GST瓊脂糖凝膠FF（GST Tanrose 4FF）分離，然后再用腸激酶或凝血酶等酶解就得到表達(dá)的產(chǎn)物。凝血酶可以用肝素瓊脂糖凝膠FF（Heparin Tanrose 6FF）或苯甲脒瓊脂糖凝膠FF（Benzamidine Tanrose 4FF）分離。

陰離子交換在血漿蛋白的純化中應(yīng)用非常廣泛，結(jié)合低溫乙醇法在丙種球蛋白純化后期用DEAE-瓊脂糖凝膠FF（DEAE Tanrose  6FF）吸附二聚體等雜質(zhì)從而達(dá)到提高產(chǎn)品純度的目的，同樣也可以在白蛋白純化過程中使用陰離子交換吸附PKA、微量的IgG以及聚體，在凝血VIII因子純化過程中使用大孔徑的Q瓊脂糖凝膠（Solid Q）可以增加載量和回收率。

核酸的純化用于去除影響測序或PCR污染物等研究。核酸可大致上分為質(zhì)粒DNA、噬菌體DNA和PCR產(chǎn)物等。病毒也可視作核酸大分子，和質(zhì)粒DNA一樣，可用分離大分子的Tanrose 4FF 凝膠過濾介質(zhì)去除雜蛋白，再配合離子交換 Q瓊脂糖凝膠（Q Tanrose 6FF）分離核酸。也可以用DEAE瓊脂糖凝膠FF（DEAE Tanrose  6FF）或Q瓊脂糖凝膠FF（Q Tanrose 6FF）富集和分離后再上瓊脂糖凝膠6B或6FF得到純的病毒。

核酸帶陰電荷，在初步純化時(shí)利用陽離子交換介質(zhì)如 SP 或CM Tanrose FF 結(jié)合目標(biāo)蛋白，可除去大量核酸。核酸在高鹽下會和蛋白解離，疏水層析介質(zhì)很適合用來結(jié)合目標(biāo)蛋白，在純化蛋白的同時(shí)去除核酸。利用核酸酶將核酸切成小片斷，用凝膠過濾做精細(xì)純化時(shí)便很容易去除了。

中藥的化學(xué)成分極其復(fù)雜。傳統(tǒng)中藥多是煎熬后服用，有效成分多較為親水，包括生物堿、黃酮、蒽醌、皂甙、有機(jī)酸、多糖、肽和蛋白質(zhì)。靈活及綜合性地利用多種層析方法。如離子交換、分子篩、反相層析，更容易分離到單一活性成分。葡聚糖凝膠LH-20（Tandex LH-20）同時(shí)具備吸附性層析和分子篩功能，例如：用甲醇分離黃酮甙，三糖甙先被洗下來，二糖甙其次，單糖甙隨后，最后是甙元。葡聚糖凝膠LH-20（Tandex LH-20）可使用水、醇、丙酮、氯仿等各種試劑，廣泛用于各種天然產(chǎn)物的分離，包括生物堿、甙、黃酮、醌類、內(nèi)脂、萜類、甾類等。

生物堿在酸性緩沖液中帶正電，成為鹽，SP陽離子交換層析柱可以分離許多結(jié)構(gòu)非常近似的生物堿。相反，黃酮、蒽醌、皂甙、有機(jī)酸等可溶于偏堿的緩沖液中，在Q陰離子交換柱上分離效果良好。

使用凝膠過濾介質(zhì)Tandex G10、G15、G25等去除小分子，效率高，處理量可達(dá)床體積30%。只需在進(jìn)樣后收集首1/3-1/2柱體積的洗脫液，就可以去除該填料分離范圍上限以下的小分子，簡單直接。由于只是去除小分子，柱高10cm以上即可。整個過程一般可于數(shù)分種至半小時(shí)完成。月旭Tandex G25系列介質(zhì)專為蛋白質(zhì)脫鹽而設(shè)計(jì)。

病毒、DNA疫苗或質(zhì)粒可以用瓊脂糖凝膠6B除鹽或交換緩沖液，蛋白、抗體等可以用葡聚糖凝膠G25快速去鹽和交換緩沖液。